探索细胞自噬在纽兰格林－1(neuregulin－1，NRG－1)保护阿霉素所致心肌细胞损伤中的作用，并进行相关信号通路的分析和机制探讨。
方法分离并培养1～2 d SD大鼠乳鼠原代心肌细胞，将细胞随机分为正常对照组、阿霉素组(1 μmol/L)、NRG－1组(1 μg/ml)、磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002组(10 μmol/L)、抗氧化剂N－乙酰半胱氨酸组(NAC组，50 μmol/L)。蛋白免疫印迹法(Western Blot，WB)检测自噬相关蛋白LC3 Ⅱ、Beclin 1的水平以及Akt总蛋白及其磷酸化水平。转染GFP－LC3质粒检测细胞自噬水平。利用荧光探针2′，7′－二氯荧光黄双乙酸盐(DCFA－DA)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平。
结果与阿霉素组相比，纽兰格林－1可以抑制阿霉素所致的细胞自噬相关蛋白Beclin 1[(3.48±0.84)比(1.94±0.75)，P<0.05]、LC3 Ⅱ[(2.26±0.78)比(0.94±0.48)，P<0.05]的表达水平，以及GFP－LC3阳性细胞数(P<0.05)，以及抑制细胞内ROS[(174±3.8)比(114±2.4)，P<0.05]的水平，NAC联合阿霉素组与纽兰格林－1联合阿霉素组取得的效果大体一致。与阿霉素组相比，NRG－1联合阿霉素组可使丝氨酸－苏氨酸激酶(Akt)的磷酸化水平显著升高[(1.12±0.54)比(2.18±0.62)，P<0.05]。与NRG－1联合阿霉素组相比，加用PI3K抑制剂LY294002可使Akt的磷酸化水平下降[(2.18±0.62)比(1.04±0.82)，P<0.05]，细胞自噬相关蛋白Beclin 1[(1.26±0.71)比(4.63±0.72)，P<0.05]、LC3Ⅱ[(1.96±0.57)比(5.02±0.81)，P<0.05]和细胞内ROS[(102±4.5)比(157±4.9)，P<0.05]的表达水平升高。
结论NRG－1对心肌细胞自噬的调节是通过PI3K/Akt/ROS信号通路来实现的。