酵母α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达

来源 :长沙理工大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tnngx123

【摘要】

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酵母编码α-半乳糖苷酶的基因MEL1被扩增并克隆到表达载体pRSET中.重组质粒pRSET-Gal转化至相应的受体菌BL21(DE3)PlysS,阳性克隆经液体培养和IPTG诱导表达.通过SDS-PAGE分析

【作者】

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周双德张学文唐香山

【机构】

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湖南省农业生物工程研究所,湖南农业大学

【出处】

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长沙理工大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2005年1期

【关键词】

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半乳糖苷酶基因大肠杆菌酵母 SDS-PAGE分析 α-半乳糖苷酶表达载体重组质粒诱导表达 IPTG 液体培养阳性克隆分子大小生物活性受体菌糖

【基金项目】

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湖南省科技厅中青年科技基金

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酵母编码α-半乳糖苷酶的基因MEL1被扩增并克隆到表达载体pRSET中.重组质粒pRSET-Gal转化至相应的受体菌BL21(DE3)PlysS,阳性克隆经液体培养和IPTG诱导表达.通过SDS-PAGE分析,在50 kD处有一目的分子大小的亮带.裂解细菌后经X-α-Gal的显色底物反应,液体变蓝.试验表明:α-半乳糖苷酶基因MEL1在大肠杆菌中得到了表达,糖基化对于维持此酶的生物活性不是必须的.

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