HIV-1整合酶真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达和定位

来源 :昆明医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wuyan425

【摘要】

：

目的构建重组基因表达载体pcDNA6／V5-HisA—IN并观察其在Hela细胞中的表达．对HIV-1整合酶表达以后在细胞里的定位情况进行研究．方法通过PCR扩增和定向克隆技术构建重组真核表达

【作者】

：

谷万港张丽张旋

【机构】

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遵义医学院基础医学院免疫学教研室,昆明医科大学学报编辑部,昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室

【出处】

：

昆明医科大学学报

【发表日期】

：

2013年9期

【关键词】

：

HIV-1 整合酶细胞核 FITC HIV-1 intease ： Eukarvotic expression vector： The nuclei： FIT

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目的构建重组基因表达载体pcDNA6／V5-HisA—IN并观察其在Hela细胞中的表达．对HIV-1整合酶表达以后在细胞里的定位情况进行研究．方法通过PCR扩增和定向克隆技术构建重组真核表达载体D。DNA6／V5-HisA—IN．以Lipofectamine2000介导转染Hela细胞．细胞用4％的多聚甲醛固定以后，经过PI对细胞核染色，整合酶抗体跟整合酶反应以后，用FITC标记的二抗进行孵育，用共聚焦显微镜观测整合酶在细胞中的表达情况．结果经过定向克隆和测序鉴定证实，重组真核表达载体pcDNA6／V5

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