黄瓜花叶病毒和番茄花叶病毒双价抗性RNA沉默表达载体的构建

来源 :石河子大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：qinxinhun

【摘要】

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利用基因沉默的原理构建了能转录产生dsRNA,诱导植物发生RNA沉默的沉默载体。根据已报道的番茄花叶病毒（ToMV）的运动蛋白基因（MP）和黄瓜花叶病毒（CMV）的沉默抑制子基因（Rep）的核苷酸

【作者】

：

秦荣张伟刘炜炜张建云黄家风

【机构】

：

石河子大学绿洲农作物病害防控重点实验室

【出处】

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石河子大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2012年4期

【关键词】

：

dsRNA 基因沉默融合基因载体构建双价抗性

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(30860162)

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利用基因沉默的原理构建了能转录产生dsRNA,诱导植物发生RNA沉默的沉默载体。根据已报道的番茄花叶病毒（ToMV）的运动蛋白基因（MP）和黄瓜花叶病毒（CMV）的沉默抑制子基因（Rep）的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到△MP基因片段和Rep基因片段;然后通过重组PCR技术将2个病毒基因进行融合,获得长度为711bp的融合基因△MP-Rep。将融合基因以反向重复的方式与大豆内含子相连,得到含有融合基因反向重复序列的重组质粒pBlue SK-Intron△MP-Rep（i/r）。再用限制性内切酶BamHⅠ

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