【摘 要】
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极管作为微孢子虫高度特异的结构,在微孢子虫侵染宿主细胞的过程中扮演重要角色。利用家蚕微孢子虫和兔脑炎微孢子虫基因组数据,通过共线性分析获得一个编码家蚕微孢子虫假定
【机 构】
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家蚕基因组生物学国家重点实验室,西南大学; 重庆师范大学生命科学学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金重点项目(No.30930067);国家自然科学基金项目(No.31101770);高校博士学科点专项科研基金新教师类项目(No.20120182120014);中央高校基础研究项目(No.XDJK2012C085);西南大学博士基金项目(No.SWUB111081)
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极管作为微孢子虫高度特异的结构,在微孢子虫侵染宿主细胞的过程中扮演重要角色。利用家蚕微孢子虫和兔脑炎微孢子虫基因组数据,通过共线性分析获得一个编码家蚕微孢子虫假定极管蛋白的基因NBO7g0016。序列特征分析表明该基因编码富含脯氨酸的409个氨基酸,预测蛋白质分子质量39.6 kD,蛋白质序列的N端具有信号肽,有40个潜在的O-糖基化位点和17个磷酸化位点。以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板克隆NBO7g0016基因,并构建插入该基因的重组质粒,转化E.coli BL21（DE3）进行原核表达,融合蛋白经亲和层析纯化后免疫昆明小鼠制备多克隆抗体。免疫印迹实验证明该基因编码的蛋白质在成熟孢子中有表达,间接免疫荧光实验将蛋白质定位于家蚕微孢子虫的极管,确证该蛋白质为家蚕微孢子虫极管蛋白1（NbPTP1,GenBank登录号:EOB15198.1）。初步推测家蚕微孢子虫极管蛋白1具有糖基化修饰特征。
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