自杀基因质粒表达载体pcDNA3.1(-)CMV.TK在鼻咽癌细胞中的构建及转染研究

来源 :中国耳鼻咽喉颅底外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenjie033
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目的构建含TK自杀基因的质粒表达载体并进行转染研究.方法根据已发表的Hsv-TK基因的核苷酸序列,设计并合成一对引物,以含TK基因的PGEM/TK质粒为模板扩增出TK基因全长CDS序列,将其克隆到质粒表达载体pcDNA3.1(-)CMV中,进行序列分析和酶切鉴定后,运用电穿孔法将重组体 pCDNA3.1(-)CMV.CD转入鼻咽癌CNE-2细胞中,观察其表达情况以及无毒前体药物GCV干预下对CNE-2细胞生长的抑制作用.结果酶切和序列分析证明pcDNA3.1(-)CMV.TK含完整的TK基因序列,RT-P
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