【摘 要】
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目的 观察等离子体激活液(PAS)对血管瘤内皮细胞(HemECs)的增殖和凋亡作用,并对相关机制进行探讨.方法 低温等离子体(CAP)分别辐照磷酸盐缓冲液(PBS)10、20、30、40、50 s形成PAS,以处理时间为0 s的PBS为对照组.电子pH计和试剂盒分别检测PAS的pH值和活性介质浓度;CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;DCFH-DA荧光标记细胞内活性氧(ROS)变化;蛋白免疫印迹检测细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)
【机 构】
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安徽医科大学第二附属医院皮肤性病科,合肥 230601
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目的 观察等离子体激活液(PAS)对血管瘤内皮细胞(HemECs)的增殖和凋亡作用,并对相关机制进行探讨.方法 低温等离子体(CAP)分别辐照磷酸盐缓冲液(PBS)10、20、30、40、50 s形成PAS,以处理时间为0 s的PBS为对照组.电子pH计和试剂盒分别检测PAS的pH值和活性介质浓度;CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;DCFH-DA荧光标记细胞内活性氧(ROS)变化;蛋白免疫印迹检测细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)蛋白的表达量.结果 与对照组相比,PAS中的pH值呈剂量依赖性降低,而溶液中的活性介质NO3-、H2 O2和O3的浓度逐渐升高;与对照组相比,PAS显著提高了HemECs细胞内ROS水平,抑制其增殖,并促进凋亡;与对照组相比,PAS处理10 s时AKT的磷酸化水平变化不明显,但在CAP处理时间增加至20～50 s后,AKT的磷酸化水平迅速降低,而PI3K磷酸化水平变化不明显.结论 PAS对HemECs细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用,这种作用与细胞内ROS的升高和AKT磷酸化水平的下调相关.
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