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目的: 构建pGEX-dif14原核表达载体,在大肠杆菌中表达dif14蛋白片段以获得其抗原. 方法: 采用N末端融合谷胱甘肽巯基转移酶(GST)的pGEX-4T-1载体,根据dif14基因开放读框N端52氨基酸序列设计引物PCR扩增并购建原核表达载体,测序证实. 在大肠杆菌DH5α中进行表达. 结果: 测序证实dif14原核表达载体构建正确,含pGEX-dif14表达质粒的大肠杆菌经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后能够表达约Mr 35×103的融合蛋白. 结论: 成功地构建了原核表达质粒p