重组表达载体pIRES-CD、pIRES-TK的构建及其在ACC-2细胞中的表达

来源 :山东大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:wqsemail
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目的:运用分子生物学技术扩增CD、TK基因,进行其DNA序列分析,并构建真核表达质粒pIRES-CD及pIRKS-TK,将其共同转染ACC-2细胞,为进一步研究双自杀基因对ACC-2细胞杀伤作用奠定基础。方法:根据CD和TK基因DNA的序列分别设计、合成引物,构建克隆载体pMD18-T-CD和pMD18-T-TK,并进行DNA序列分析;构建以内部核糖体进入位点(IREs)相连的CD和TK基因的真核表达质粒pIRKS-CD及pIRES-TK,用电穿孔法以真核表达质粒共同转染ACC-2细胞,用RT-PCR检测
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