【摘 要】
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目的在人肺癌细胞系NCI-H1650中分离出肺癌干细胞及鉴定。方法将NCI-H1650细胞在含人胰岛素、重组人表皮生长因子(EGF)、重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、牛血清清蛋白(
【机 构】
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第三军医大学新桥医院肿瘤科/全军肿瘤诊治研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金资助项目(81302025)
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目的在人肺癌细胞系NCI-H1650中分离出肺癌干细胞及鉴定。方法将NCI-H1650细胞在含人胰岛素、重组人表皮生长因子(EGF)、重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、牛血清清蛋白(BSA)的无血清培养基中连续培养,用紫杉醇刺激诱导干细胞,通过流式细胞术、免疫荧光的方法分析肺癌干细胞标志物CD133和CD326的表达;采用RT-PCR和Western blot的方法检测干细胞相关标记物Oct4、Nanog和Sox-2的表达。结果经无血清连续培养结合紫杉醇诱导的NCI-H1650细胞呈球形悬浮生长,相比于有血清培养的NCI-H1650细胞,其干细胞标志物CD133和CD326高表达,干细胞相关标志物Oct4、Nanog和Sox-2表达水平提高(P<0.05)。结论采用体外无血清连续培养结合紫杉醇刺激诱导NCI-H1650细胞能有效分离出其中干细胞。
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