【摘 要】
：
目的 探讨合成型血管平滑肌细胞(VSMCs)的分离、培养及鉴定方法.方法 采用改良Ⅱ型胶原酶消化法分离、体外培养SD大鼠胸主动脉VSMCs,胰酶消化传代获取第3代细胞,分为空白组与血小板衍生因子-BB(PDGF-BB)处理组.噻唑蓝(MTT)比色法及细胞划痕实验分别检测分析细胞增殖活性与迁移活性;倒置显微镜、结晶紫染色观察形态学改变;免疫细胞化学染色鉴定VSMCs并测定分析收缩型标记蛋白α-平滑肌
【机 构】
：
210009南京,江苏省分子与功能影像重点实验室东南大学附属中大医院放射科,210009南京,江苏省分子与功能影像重点实验室东南大学附属中大医院放射科,210009南京,江苏省分子与功能影像重点实验室
论文部分内容阅读
目的 探讨合成型血管平滑肌细胞(VSMCs)的分离、培养及鉴定方法.方法 采用改良Ⅱ型胶原酶消化法分离、体外培养SD大鼠胸主动脉VSMCs,胰酶消化传代获取第3代细胞,分为空白组与血小板衍生因子-BB(PDGF-BB)处理组.噻唑蓝(MTT)比色法及细胞划痕实验分别检测分析细胞增殖活性与迁移活性;倒置显微镜、结晶紫染色观察形态学改变;免疫细胞化学染色鉴定VSMCs并测定分析收缩型标记蛋白α-平滑肌肌动蛋白(SMA)以及合成型标记蛋白平滑肌胚胎型肌球蛋白重链(SMemb)、原肌球蛋白-4(TPM-4)表达量的变化.结果 空白组VSMCs呈典型“谷峰状”生长,SMA细胞免疫荧光染色及免疫细胞化学染色阳性率≥95％;PDGF-BB处理组VSMCs由收缩型长梭状形态向合成型扁平状形态转化(P＜0.05),VSMCs增殖及迁移活性分别增加11.48％、1.92倍(P＜0.05);收缩型标记蛋白SMA表达下降(P＜0.05),合成型标记蛋白SMemb及TPM-4表达均增加(P＜0.05).结论 PDGF-BB处理后,VSMCs由收缩表型向合成表型转化,增殖迁移活性增加,收缩型标记蛋白表达下降、合成型标记蛋白呈现高表达,表现为高合成型VSMCs的特点。
其他文献
游离脂肪酸(FFA)是构成人体的重要成分,参与血脂代谢.研究表明,FFA水平升高可导致外周胰岛素抵抗,而胰岛素抵抗的个体载脂蛋白M(ApoM)水平下降[1].本研究旨在观察FFA水平升高是否会直接下调ApoM并探讨其机制.一、材料和方法大鼠血浆FFA浓度检测、肝脏组织中mRNA的提取、逆转录、实时定量聚合酶链反应和PCR芯片(Qiagen公司)反应严格参照试剂盒说明书操作.大鼠ApoM和内参照基因
【摘 要】研究了保护电器级差配合试验的方法以及直流系统短路电流估算法，该研究是针对电力直流电源系统保护电器越级跳闸现象所开展的。文章将保护电器特性仿真法与额定电流校核法进行了对比，对此提出选择性校验试验法。直流电源保护电器级差配合装置就是根据短路电流预估算法研制的。 【关键词】直流系统 短路电流 级差配合试验装置 保护电器 直流电源系统能够供给人们日常生活、工作中所需的直流电源依靠的是电力工程
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
欧文·沃姆:非常高兴今天来做这个讲座,跟大家分享我的作品,同时也和隋建国老师来做对话。我接下来会跟大家介绍在过去二十多年创作的一些主要的作品。其中一个是我做的《胖
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
目的观察性研究显示高密度脂蛋白胆固醇（HDL–C）具有心血管保护功能，但随机对照临床试验发现单纯升高HDL–C并未减少心血管病事件。可能的假设是不同的高密度脂蛋白颗粒（HDL–P）亚型与心血管病发生风险的关联不同。对HDL–P及其亚型与心血管病事件关系的前瞻性研究进行荟萃分析。方法数据来源MEDLINE、Cochrane图书馆和CNKI数据库，对相关参考文献进行核查。检索截止日期为2013年7月1
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥