【摘 要】
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目的:观察胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对体外培养的滋养层细胞粘附到细胞外基质的影响,研究IGF-Ⅰ在胚胎着床过程中的调节作用.方法:原代培养滋养层细胞,建立体外滋养层细胞
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心
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目的:观察胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对体外培养的滋养层细胞粘附到细胞外基质的影响,研究IGF-Ⅰ在胚胎着床过程中的调节作用.方法:原代培养滋养层细胞,建立体外滋养层细胞粘附模型,IGF-Ⅰ按不同的时间和剂量处理细胞,用酶联免疫检测仪测定光密度值代表粘附细胞的相对数目.免疫细胞化学法检测粘着局部磷酸化粘着斑激酶(pFAK)的表达.结果:随IGF-Ⅰ浓度的增加,滋养层细胞的粘附数目明显增多,差异具有显著性意义(P<0.05),100 nM时粘附细胞数目最多,但与10nM时相比,差异无显著性意义(P>0.05).相同浓度的IGF-Ⅰ处理时,随时间的延长,粘附细胞数目也明显增多,差异具有显著性意义(P<0.05),10 nM IGF-Ⅰ培养2 h达最佳量效反应(P<0.001).加入抗整合素αvβ3抗体能明显阻止其促粘附作用(P<0.001).免疫组化染色显示10 nM IGF-Ⅰ处理后,粘着局部出现pFAK,而对照组则无pFAK表达.结论:IGF-Ⅰ能促进滋养层细胞粘附到纤维粘连蛋白(FN),且这种粘附过程具有明显的时间和剂量依赖性,生理剂量的IGF-Ⅰ通过刺激整合素与配体结合,激活FAK,进而激活整合素介导的信号传导通路,显著促进滋养层细胞粘附到细胞外基质.
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