【摘 要】
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将重组质粒pET30a-bme转化至表达宿主菌E.coli BL21(DE3),在终浓度0.2mmol/L的IPTG诱导下,实现BME功能性表达,利用亲和层析纯化表达产物,并研究其酶学性质。分离纯化的重组酯酶
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将重组质粒pET30a-bme转化至表达宿主菌E.coli BL21(DE3),在终浓度0.2mmol/L的IPTG诱导下,实现BME功能性表达,利用亲和层析纯化表达产物,并研究其酶学性质。分离纯化的重组酯酶经SDS-PAGE电泳检测为单一条带,其分子量约为41.5 kDa。该酶最适反应温度和pH分别为70℃与7.5,比酶活为200 U/mg。BME能耐受低浓度(1mmol/L)的Na+,Zn2+,Ca2+,Mg2+,Mn2+和EDTA等,但较高浓度(5 mmol/L)的Na+,Zn2+,Ca2+对酶活有
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