【摘 要】
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目的毛钩藤碱(hirsutine,HS)是从传统中药钩藤中提取出的一种生物碱单体,具有降压、抗感染、心脏保护和抗肿瘤等药理作用。本研究旨在探讨HS对肝癌SMMC-7721细胞的促凋亡作用
【机 构】
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北票市中心医院普外二科; 北京大学国际医院腹膜后肿瘤外科;
【基金项目】
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北京市科委首都特色临床应用研究项目(Z161100000516025)
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目的毛钩藤碱(hirsutine,HS)是从传统中药钩藤中提取出的一种生物碱单体,具有降压、抗感染、心脏保护和抗肿瘤等药理作用。本研究旨在探讨HS对肝癌SMMC-7721细胞的促凋亡作用及其机制。方法以终浓度分别为25、50和100μmol/L HS处理SMMC-7721细胞24h后,细胞增殖检测试剂盒8(cell counting kit 8,CCK8)法检测HS对SMMC-7721细胞活性的影响,流式细胞仪检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量和细胞凋亡,蛋白质印迹法分析p-eIF2α、CHOP、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3和cleaved多腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)的表达。结果 CCK8实验显示,HS可剂量依赖性地抑制SMMC-7721细胞活力,F=44.536,P<0.001。流式结果显示,0、25、50和100μmol/L HS作用SMMC-7721细胞24h,代表ROS含量的MIF值分别为237±13、281±15、342±12和396±16,F=46.473,P<0.001;细胞凋亡率分别为(2.5±1.2)%、(9.8±1.4)%、(17.3±2.1)%和(28.5±1.9)%,F=70.316,P<0.001。蛋白质印迹实验结果显示,100μmol/L HS作用SMMC-7721细胞24h后,促凋亡蛋白p-eIF2α、CHOP、cleaved Caspase-3和cleaved PARP表达上调,均P<0.001;抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,P=0.001。同时,eIF-2α磷酸化抑制剂Salubrinal和抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸可抑制HS的上述作用。结论 HS可通过ROS激活内质网应激,下调Bcl-2/Bax比率诱导SMMC-7721细胞凋亡。
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