观察在体外实验中,Toll样受体4(TLR4)对人结直肠癌细胞HT29和SW480酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)表达的影响及其癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。
方法通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测TLR4和ACAT1在结直肠癌组织和细胞株中的表达水平。利用TLR4小干扰RNA(siRNA)特异性沉默TLR4后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell小室检测并评估人结直肠癌细胞HT29和SW480的增殖、侵袭和迁移能力的变化。采用RT-PCR和Western blot法研究TLR4和ACAT1之间的关系。
结果相对于癌旁组织,结直肠癌组织TLR4和ACAT1 mRNA和蛋白表达明显增高(TLR4 mRNA:2.395 0±0.247 7比1.093 0±0.075 8,P=0.000;ACAT1 mRNA:2.196 0±0.189 5比1.093 0±0.075 8,P=0.000);人结直肠癌细胞株HT29、SW480、Caco-2和DLD-1相对于正常人结直肠细胞株FHC TLR4和ACAT1表达也均表达上调。TLR4 siRNA抑制TLR4的表达,可抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移。同时,TLR4 siRNA在结直肠癌细胞HT29中可降低ACAT1的表达(mRNA:0.350 0±0.145 7比1.017 0±0.145 0,P=0.032;蛋白:0.523 3±0.052 1比1.140 0±0.105 8,P=0.006),而利用ACAT1的慢病毒基因过表达载体pLV-Neo-ACAT1使ACAT1过表达后,可解除TLR4 siRNA对结直肠癌的这一抑制作用。
结论TLR4 siRNA在结直肠癌细胞中通过影响ACAT1的表达以抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移。