RNAi抑制大鼠骨髓源树突状细胞MHC-Ⅱ表达的研究

来源 :天津医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ny341
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目的:应用RNAi技术探讨靶向主要组织相容性复合物Ⅱ类抗原反式转录激活因子(CⅡTA)的shRNA质粒载体抑制大鼠骨髓源树突状细胞(DC)表面MHC-Ⅱ类抗原表达的可行性。方法:体外培养大鼠骨髓源DC;流式细胞仪检测DC表面抗原MHC-Ⅱ、OX-62表达情况;体外合成针对CⅡTA mRNA序列特异性CⅡTA shRNA并构建质粒,在阳离子脂质体介导下转染DC;流式细胞仪检测细胞表面抗原MHC-Ⅱ表达水平的变化。结果:(1)经体外培养DC可用于后续反应,体外构建质粒成功;(2)流式细胞仪检测显示CⅡTA-shRNA质粒组中DC转染后MHC-Ⅱ的抗原水平均较对照组明显降低。结论:利用CⅡTA shRNA质粒载体沉默CⅡTA基因从而下调MHC-Ⅱ的表达的策略是可行的,为降低移植排斥反应提供了实验依据。
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