【摘 要】
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目的 分析长链非编码RNA H19调控含aarF域激酶4（aarF domain containing kinase 4,ADCK4）基因的分子机制，为儿童肾病综合征的诊断和治疗提供新思路。方法 收集30例江南大学附属儿童医院肾脏风湿免疫科肾病综合征患儿和30例外科择期手术患儿的外周血样，采用实时定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain re
【基金项目】
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无锡市卫健委面上项目（MS201759）～～；
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目的 分析长链非编码RNA H19调控含aarF域激酶4（aarF domain containing kinase 4,ADCK4）基因的分子机制，为儿童肾病综合征的诊断和治疗提供新思路。方法 收集30例江南大学附属儿童医院肾脏风湿免疫科肾病综合征患儿和30例外科择期手术患儿的外周血样，采用实时定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测H19和ADCK4基因的表达，用qRT-PCR或蛋白质印迹法检测H19在小鼠肾足细胞中过表达或下调时ADCK4的表达，荧光素酶活性分析检测H19是否能调节ADCK4的启动子活性。此外，通过质谱分析寻找能够与H19结合的转录因子，并通过RNA免疫沉淀法进一步证实H19与候选转录因子的关系。结果 肾病综合征患儿外周血样中，长链非编码RNA H19表达下调，ADCK4基因表达也下调。在小鼠肾足细胞中，H19过表达促进ADCK4的表达，而H19基因敲除则抑制ADCK4的表达。此外，我们的研究还表明，H19可以调节ADCK4的启动子活性。通过RNA下拉和质谱技术，我们发现转录因子含THAP结构域的蛋白1可以与H19结合。结论 外周血中长链非编码RNA H19为儿童肾病综合征的诊断和预后判断提供了新思路。
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