观察连翘对内毒素(ET)作用下大鼠脾脏淋巴细胞Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素(IL)-6及IL-10的影响,探讨其抗炎及免疫调节的作用。
方法无菌操作分离大鼠脾脏,制备脾脏淋巴细胞并用含20%胎牛血清的DMEM培养基培养,分为对照组(Control)、ET组、连翘高、中、低剂量组[连翘水煎液(AFS)1+ ET、AFS2+ ET、AFS3+ ET]及多黏菌素B组(Ploy B+ ET);AFS1+ ET、AFS2+ ET、AFS3+ ET组及Ploy B+ ET组分别加入AFS 50. 0、25. 0、12. 5 g/L及多黏菌素B 10 mg/L培养0. 5 h后,再分别加入10μg/L ET培养12 h;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测TLR4及NF-κB表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞分泌IL-6及IL-10的水平。
结果与Control组比较,ET组TLR4、NF-κB表达水平明显升高(1. 38 ±0. 05比0. 47±0. 01;2. 37±0. 09比0. 68±0. 09,P< 0. 01),IL-6及IL-10分泌水平明显增高[(65. 96±0. 26)ng/L比(16. 59±0. 23)ng/L;(21. 01±0. 16)ng/L比(9. 17±0. 14)ng/L,P< 0. 01]; AFS1+ ET、AFS2+ ET、AFS3+ ET组均能显著减轻上述变化,并呈剂量依赖关系;AFS1+ ET组与Ploy B+ ET组比较差异无统计学意义[0. 67±0. 03比0. 74±0. 02;1. 22±0. 12比1. 35±0. 10;(21. 54 ±0. 47)ng/L比(22. 20±0. 40)ng/L;(11. 37±0. 21)ng/L比(11. 85±0. 20)ng/L,P> 0. 05]。
结论连翘预处理能降低ET作用下大鼠脾脏淋巴细胞TLR4、NF-κB的表达及IL-6、IL-10的分泌,有抗炎及免疫调节作用。