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目的
探讨紫杉醇诱导白血病细胞凋亡的信号途径及死亡结构域沉默子(SODD)分子靶向对紫杉醇化疗的增敏作用。
方法采用Western blot法检测紫杉醇对人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞SODD、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)、核转录因子(NF-кB)-P65蛋白表达的影响;构建1个载体编码3条质粒表达载体的SODD小分子干扰质粒,转染至Jurkat细胞,采用碘化丙啶(PI)标记流式细胞术检测紫杉醇对细胞的凋亡诱导率。
结果紫杉醇在诱导Jurkat白血病细胞凋亡过程中能显著下调SODD及Bcl-2蛋白的表达,在该凋亡过程中Caspase-3酶原逐渐被水解剪切并促进NF-кB活化表达;通过转染SODD小分子干扰质粒的Jurkat白血病细胞对紫杉醇的凋亡敏感性显著高于对照组,差异有统计学意义(F=10.35,P<0.05)。
结论紫杉醇可有效诱导白血病细胞凋亡,SODD/Bcl-2基因调控代表了一个独特的紫杉醇类诱导的细胞凋亡信号传导通路,这条通路最终通过激活Caspase-3执行,而NF-κB在这条通路中对相关凋亡基因起反应性调节作用。小分子干扰技术抑制白血病细胞SODD表达后能显著增加紫杉醇的化疗敏感性。