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目的
评价不同浓度和时间应用羟乙基淀粉130/0.4(HES 130/0.4)对人肾小管上皮细胞损伤的影响。
方法人肾小管上皮细胞HK-2细胞培养至对数生长期时,以1×105个/ml密度接种于96孔培养板(0.1 ml/孔)、培养瓶(5 ml/瓶)或培养皿(5 ml/皿),采用随机数字表法,将其分为4组(n=49),正常对照组(C组)加入等容量磷酸盐缓冲液,0.3%、1.5%、3.0% HES 130/0.4组(H1组、H2组和H3组)分别采用相应终浓度的HES 130/0.4孵育。分别于孵育1、3、5和7 d时测定细胞活力,于孵育3、5和7 d时测定细胞凋亡率,于孵育7 d时进行甲苯胺蓝特殊染色,光镜下观察细胞内HES沉积情况,透射电镜下观察细胞病理学结果。
结果与C组比较,H3组孵育5、7 d时细胞活力降低,孵育3、5、7 d时细胞凋亡率升高(P<0.05),H1组和H2组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);光镜和电镜下H2组和H3组细胞内有HES沉积,H3组病理学损伤明显,且有凋亡细胞。
结论高浓度长时间应用HES 130/0.4可导致人肾小管上皮细胞损伤,而高浓度及低浓度短时间应用对其无影响。