论文部分内容阅读
目的：利用慢病毒载体介导小鼠颏舌肌成肌细胞ERα基因沉默，筛选鉴定后建立ERα基因稳定下调的细胞群。方法：设计合成4组针对小鼠ERα基因的shRNA序列（ERα-321、ERα-693、ERα-978、ERα-1297）及1组阴性对照序列（shNC），连接到经双酶切处理过的pGLV3/H1/GFP载体上，转染293T细胞包装产生慢病毒。用慢病毒转染体外培养的小鼠颏舌肌成肌细胞，流式细胞仪筛选后提取细胞RNA，RT-PCR法鉴定各组细胞中ERα的RNA干扰效果。结果：细胞转染5种慢病毒后荧光率分别为21.4