【摘 要】
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目的构建分泌型抗肝癌单链免疫毒素真核表达载体并在人肝癌细胞系SMMC-7721中表达.方法采用PCR方法在抗肝癌sFv 的5′端引入引导序列使其能够在真核细胞中表达并分泌,在其下
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目的构建分泌型抗肝癌单链免疫毒素真核表达载体并在人肝癌细胞系SMMC-7721中表达.方法采用PCR方法在抗肝癌sFv 的5′端引入引导序列使其能够在真核细胞中表达并分泌,在其下游连接人TNF-α基因,构建分泌型抗肝癌单链免疫毒素基因,并将该基因克隆入带有GFP报告基因的真核表达载体,用磷酸钙共沉淀法转染人肝癌细胞系SMMC-7721进行瞬时表达.结果 DNA序列分析证实在sFv 的5′端引入正确的60 bp引导肽序列, 酶切鉴定证明成功构建了分泌型抗肝癌单链免疫毒素融合GFP真核表达载体,并在SMMC-
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