【摘 要】
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目的研究Zn^2+对PPR蛋白锌指结构域的原核表达、纯化过程的影响,并对Zn^2+的作用机制进行了初步探索。方法采用分子克隆的方法构建PPR蛋白锌指结构域及其突变体的His-SUMO融
【基金项目】
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国家级大学生创新创业计划项目(No.105-03-0178028)
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目的研究Zn^2+对PPR蛋白锌指结构域的原核表达、纯化过程的影响,并对Zn^2+的作用机制进行了初步探索。方法采用分子克隆的方法构建PPR蛋白锌指结构域及其突变体的His-SUMO融合蛋白表达质粒,研究Zn^2+对其原核表达及Ni-柱亲和纯化过程的影响,并利用快速诱导法对Zn^2+的作用机制进行了初步探索。结果培养基中添加1mmol/LZn^2+可明显提高融合蛋白的稳定性;亲和纯化时在上清中添加10mmol/LEDTA可明显提高亲和纯化效率;Zn^2+作用机制的初探实验表明只有Zn^2+可作用于锌指结构
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