探讨腺病毒介导白细胞介素24(Ad-IL-24)对脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的作用及其作用机制。
方法将Ad-IL-24基因重组腺病毒感染脑胶质瘤U251细胞,设立Ad-IL-24组、Ad-绿色荧光蛋白(GFP)组、PBS组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹实验检测各组的IL-24表达情况,通过MTT实验检测3组U251细胞的增殖活性,应用流式细胞仪检测U251细胞的凋亡情况,并采用qRT-PCR检测U251细胞中Survivin和Bax的表达情况。
结果(1)PBS组和Ad-GFP组的U251细胞贴壁生长状态良好,Ad-IL-24组的贴壁生长细胞数量明显减少,Ad-IL-24组和Ad-GFP组的感染效率可达95%以上;(2)qRT-PCR和蛋白免疫印迹实验结果均显示,PBS组和Ad-GFP组IL-24的表达水平均明显低于Ad-IL-24组(均P<0.05);(3)感染复数为100时,Ad-IL-24感染U251细胞48 h后,可明显抑制U251细胞的生长,其抑制作用明显高于PBS组和Ad-GFP组(均P<0.05),且随着时间的延长呈现先增强后减弱的时间依赖性(P<0.05);(4)感染复数为100时,Ad-IL-24感染U251细胞48 h后,Ad-IL-24组的细胞凋亡率为(39.2±4.2)%,明显高于PBS组和Ad-GFP组[分别为(2.5±1.0)%和(4.9±2.3)%](均P<0.05);(5)Ad-IL-24组Survivin的表达水平明显低于PBS组和Ad-GFP组(均P<0.05),而Bax的表达水平明显高于PBS组和Ad-GFP组(均P<0.05)。
结论Ad-IL-24表达可明显抑制U251细胞的生长,诱导细胞凋亡。其作用机制可能为下调凋亡抑制基因Survivin的表达及上调凋亡促进基因Bax的表达。