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绿色荧光蛋白(GFP)是一种活体荧光标记,已被用来研究基因表达、分子定位、蛋白质折叠和转运;荧光共振能量转移(FRET)是一种无损伤的光学检测方法,能检测到小于纳米的距离变化.将GFP的活体定位标记功能与FRET的高分辨率相结合,为活体研究生物分子的功能和命运开创了新的篇章.作者在介绍GFP和FRET原理的基础上,综述了基于GFP的FRET在蛋白酶活性、蛋白质问相互作用和构象改变研究中的应用.