【摘 要】
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目的:以原代培养的胚胎大鼠大脑皮质神经细胞进行缺氧缺糖再给氧处理,观察党参总皂苷对神经细胞凋亡的抑制作用.方法:胚胎大鼠大脑皮质神经细胞原代培养,含连二亚硫酸钠的无
【机 构】
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北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室,北京中医药大学东直门医院中医脑病研究室
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目的:以原代培养的胚胎大鼠大脑皮质神经细胞进行缺氧缺糖再给氧处理,观察党参总皂苷对神经细胞凋亡的抑制作用.方法:胚胎大鼠大脑皮质神经细胞原代培养,含连二亚硫酸钠的无糖Earle's液进行缺氧缺糖处理造模,MTT法测定细胞存活率,Hoechst33342和PI原位双染法荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死、凋亡细胞百分率,APO-BRDU法流式细胞术检测凋亡细胞百分率,Fluo-3法流式细胞术检测细胞内Ca2+浓度,评价药效.结果:细胞存活率:与模型组[(19.69±5.80)%]比较党参总皂苷0.52 mg/L组[(39.21±12.21)%], 0.052 mg/L组[(37.91±4.67)%]能显著提高细胞存活率(P＜0.001);细胞坏死率:与模型组[(44.99±12.81)%]比较党参总皂苷0.52mg/L组[(15.66±4.67)%],0.052 mg/L组[(23.98±4.04)%]和0.005 2 mg/L组[(20.50±5.19)%]能显著降低细胞坏死率(P＜0.001);原位双染法细胞凋亡率:与模型组[(17.44±4.82)%]比较党参总皂苷0.52 mg/L组[10.58±2.04)%],0.052mg/L组[(11.61±2.35)%]能显著降低细胞凋亡率(P＜0.05);流式细胞术检测细胞凋亡率:与模型组[(8.55±3.84)%]比较党参总皂苷0.52mg/L组[(3.85±1.92)%],0.005 2mg/L组[(3.45±2.22)%]能显著降低细胞凋亡率(P＜0.05);细胞内Ca2+平均荧光值,与模型组(47.37±9.68)比较党参总皂苷0.52 mg/L组(23.56±13.19)能显著降低细胞内Ca2+平均荧光值(P＜0.05),表明党参总皂苷能明显降低细胞内Ca2+浓度.结论:党参总皂苷对缺血再灌注损伤后神经细胞的坏死和凋亡过程均具有抑制作用,这种作用可能与其能降低细胞内Ca2+浓度有关,提示党参总皂苷是党参治疗脑卒中急性期的主要效应成分.
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