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【摘要】
目的：建立测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚含量的高效液相色谱法。方法：采用AgilentTC-C18色谱柱（150mm×4.6mm，5?m），流动相为甲醇－水－磷酸（25:75:0.1），检测波长249nm，流速1.0ml/min，柱温30℃。结果：对乙酰氨基酚进样量在0.1～0.5?g范围内与峰面积的线性关系良好，平均回收率为99.38％，RSD为0.82％（n=9）。结论：高效液相色谱法简便、快速、准确，可用于腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚的含量测定。
【关键词】腰息痛胶囊；对乙酰氨基酚；高效液相色谱法；含量测定
【中图分类号】R114.3 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)10-0466-02
腰息痛胶囊为含对乙酰氨基酚的中药复方制剂，收载于卫生部药品标准，具有舒筋活络、祛瘀止痛、活血驱风的功效。临床上用于风湿性关节炎、肥大性腰椎炎、肥大性胸椎炎、颈椎炎、坐骨神经痛、腰肌劳损。现行标准采用紫外-可见分光光度法通过标准曲线的制备来测定对乙酰氨基酚的含量［1］，操作繁琐，费时。笔者采用高效液相色谱法测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚的含量，方法简便快捷，灵敏度高，重现性好，可用于该药品的含量测定及产品质量检测等，结果令人满意。
1 仪器与试药
1.1 仪器：
Agilent1100型高效液相色谱仪（美国安捷伦）
AUW120D型电子天平（日本岛津）
SK8200LH型超声仪（上海科导超声仪器有限公司）
1.2试药：
腰息痛胶囊（市售品）
对乙酰氨基酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100018-200408）；
甲醇为色谱醇，水为重蒸水，其他试剂为分析醇。
2 方法与结果
2.1 色谱条件：
色谱柱：AgilentTC-C18柱（150mm×4.6mm，5?m）；流动相：甲醇－水－磷酸（25:75:0.1）；流速：1.0ml/min；检测波长：249nm；柱温：30℃；进样量：5 l
2.2 溶液制备：
取腰息痛胶囊10粒内容物，精密称定，研匀，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚25mg），置50ml容量瓶中，加入流动相40ml并超声处理30min使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。精密称取对乙酰氨基酚对照品10mg，置50ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液5ml,置25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按处方量制备缺对乙酰氨基酚的阴性对照样品，同供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。
2.3方法学考察：
阴性干扰试验：取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图（图1）。结果表明，阴性对照品溶液不干扰对乙酰氨基酚的测定。
A．对照品溶液 B.供试品溶液 C.阴性对照品溶液
图1 高效液相色谱图
线性关系考察：精密量取对照品贮备液1,2,3,4,5ml，用流动相稀释至10ml容量瓶中，摇匀。取上述溶液，分别进样5ul。以进样量（?g）为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程Y= 442.3X-21.7，r＝0.9998（n=5）。结果表明，对乙酰氨基酚进样量在0.1～0.5?g范围内与峰面积线性关系良好。
精密度试验：精密吸取对照品溶液，进样5??l，重复5次，记录对照品峰面积，结果的RSD=0.7%（n=5）。
重复性试验：精密称取同一批样品5份，按照供试品溶液制备方法制备溶液，注入液相色谱仪测定对乙酰氨基酚的含量。结果的RSD=1.4%（n=5）。
加样回收试验：称取已知含量的腰息痛胶囊0.04g，按供试品溶液制备方法处理，精密量取续滤液5ml，分别置9個25ml的容量瓶中，每3份为1组，每组分别加对照品贮备液5.3、5.3、6.6、6.6、7.9、7.9ml，加流动相至刻度，摇匀，依法测定。结果见表1。
表1 对乙酰氨基酚加样回收试验结果（n=9）
2.4样品含量测定:
分别称取三个批号的腰息痛胶囊各10粒的内容物，精密称定，研匀，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚25mg），按供试品溶液制备方法制备溶液，取上述供试品溶液和对照品溶液，进样5 l，按外标法以峰面积计算对乙酰氨基酚的百分含量。结果批号为101101,110116,090308的3批样品中对乙酰氨基酚的百分含量分别为98.66%，105.30%，103.28%。
3 讨论
3.1根据对乙酰氨基酚溶于醇、水，故选择了流动相作为处理对照品和样品的溶剂，且甲醇、水、磷酸对本实验无干扰，磷酸还可用于调节色谱峰形。
3.2参照维C银翘片的检验标准［2］选定249nm为检测波长，在这个波长下腰息痛胶囊中的其它成分对测定对乙酰氨基酚无干扰。
3.3 原标准采用紫外-可见分光光度法通过标准曲线的制备来测定对乙酰氨基酚含量，此方法比较繁琐；而高效液相色谱法样品提取简便，选择性强，灵敏度高，重现性好，而且含量测定项下记录的色谱图中，样品溶液主峰的保留时间是否与对照品溶液主峰的保留时间一致，还可用于腰息痛胶囊的真假鉴别。
参考文献
［1］ WS3－B―1985―95，卫生部颁药品标准 中药成方制剂（第十七册）［S］.
［2］WS3－B―4000―98―2003，国家药品标准［S］.
目的：建立测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚含量的高效液相色谱法。方法：采用AgilentTC-C18色谱柱（150mm×4.6mm，5?m），流动相为甲醇－水－磷酸（25:75:0.1），检测波长249nm，流速1.0ml/min，柱温30℃。结果：对乙酰氨基酚进样量在0.1～0.5?g范围内与峰面积的线性关系良好，平均回收率为99.38％，RSD为0.82％（n=9）。结论：高效液相色谱法简便、快速、准确，可用于腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚的含量测定。
【关键词】腰息痛胶囊；对乙酰氨基酚；高效液相色谱法；含量测定
【中图分类号】R114.3 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)10-0466-02
腰息痛胶囊为含对乙酰氨基酚的中药复方制剂，收载于卫生部药品标准，具有舒筋活络、祛瘀止痛、活血驱风的功效。临床上用于风湿性关节炎、肥大性腰椎炎、肥大性胸椎炎、颈椎炎、坐骨神经痛、腰肌劳损。现行标准采用紫外-可见分光光度法通过标准曲线的制备来测定对乙酰氨基酚的含量［1］，操作繁琐，费时。笔者采用高效液相色谱法测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚的含量，方法简便快捷，灵敏度高，重现性好，可用于该药品的含量测定及产品质量检测等，结果令人满意。
1 仪器与试药
1.1 仪器：
Agilent1100型高效液相色谱仪（美国安捷伦）
AUW120D型电子天平（日本岛津）
SK8200LH型超声仪（上海科导超声仪器有限公司）
1.2试药：
腰息痛胶囊（市售品）
对乙酰氨基酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100018-200408）；
甲醇为色谱醇，水为重蒸水，其他试剂为分析醇。
2 方法与结果
2.1 色谱条件：
色谱柱：AgilentTC-C18柱（150mm×4.6mm，5?m）；流动相：甲醇－水－磷酸（25:75:0.1）；流速：1.0ml/min；检测波长：249nm；柱温：30℃；进样量：5 l
2.2 溶液制备：
取腰息痛胶囊10粒内容物，精密称定，研匀，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚25mg），置50ml容量瓶中，加入流动相40ml并超声处理30min使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。精密称取对乙酰氨基酚对照品10mg，置50ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液5ml,置25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按处方量制备缺对乙酰氨基酚的阴性对照样品，同供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。
2.3方法学考察：
阴性干扰试验：取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图（图1）。结果表明，阴性对照品溶液不干扰对乙酰氨基酚的测定。
A．对照品溶液 B.供试品溶液 C.阴性对照品溶液
图1 高效液相色谱图
线性关系考察：精密量取对照品贮备液1,2,3,4,5ml，用流动相稀释至10ml容量瓶中，摇匀。取上述溶液，分别进样5ul。以进样量（?g）为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程Y= 442.3X-21.7，r＝0.9998（n=5）。结果表明，对乙酰氨基酚进样量在0.1～0.5?g范围内与峰面积线性关系良好。
精密度试验：精密吸取对照品溶液，进样5??l，重复5次，记录对照品峰面积，结果的RSD=0.7%（n=5）。
重复性试验：精密称取同一批样品5份，按照供试品溶液制备方法制备溶液，注入液相色谱仪测定对乙酰氨基酚的含量。结果的RSD=1.4%（n=5）。
加样回收试验：称取已知含量的腰息痛胶囊0.04g，按供试品溶液制备方法处理，精密量取续滤液5ml，分别置9個25ml的容量瓶中，每3份为1组，每组分别加对照品贮备液5.3、5.3、6.6、6.6、7.9、7.9ml，加流动相至刻度，摇匀，依法测定。结果见表1。
表1 对乙酰氨基酚加样回收试验结果（n=9）
2.4样品含量测定:
分别称取三个批号的腰息痛胶囊各10粒的内容物，精密称定，研匀，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚25mg），按供试品溶液制备方法制备溶液，取上述供试品溶液和对照品溶液，进样5 l，按外标法以峰面积计算对乙酰氨基酚的百分含量。结果批号为101101,110116,090308的3批样品中对乙酰氨基酚的百分含量分别为98.66%，105.30%，103.28%。
3 讨论
3.1根据对乙酰氨基酚溶于醇、水，故选择了流动相作为处理对照品和样品的溶剂，且甲醇、水、磷酸对本实验无干扰，磷酸还可用于调节色谱峰形。
3.2参照维C银翘片的检验标准［2］选定249nm为检测波长，在这个波长下腰息痛胶囊中的其它成分对测定对乙酰氨基酚无干扰。
3.3 原标准采用紫外-可见分光光度法通过标准曲线的制备来测定对乙酰氨基酚含量，此方法比较繁琐；而高效液相色谱法样品提取简便，选择性强，灵敏度高，重现性好，而且含量测定项下记录的色谱图中，样品溶液主峰的保留时间是否与对照品溶液主峰的保留时间一致，还可用于腰息痛胶囊的真假鉴别。
参考文献
［1］ WS3－B―1985―95，卫生部颁药品标准 中药成方制剂（第十七册）［S］.
［2］WS3－B―4000―98―2003，国家药品标准［S］.