短小芽孢杆菌HZbp脂肪酶基因的克隆表达

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以短小芽孢杆菌HZbp总DNA为模板以PCR的方式获得512bp的脂肪酶基因,并在该基因的两端引入了EcnRl和Sall的酶切位点,将该基因与大肠杆菌表达质粒pSE380连接,获得重组质粒pSE380-BPL。重组质粒转入大肠杆菌表达细胞株BL21,获得工程菌株BL21-BPL。序列分析显示所克隆的基因具有脂肪酶的保守G.X-Sx—G序列,SDS-PAGE电泳显示该脂脂肪酶的分子质量约为20kDa。在LB培养基中,IPTG诱导浓度为1.0mmol/L,33℃诱导培养10h后,发酵液酶活达到8U/mL。
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