重症急性胰腺炎不同病程的细菌移位及肠道菌群组成结构的变化研究

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目的探究重症急性胰腺炎(severe acte pancreatitis, SAP)大鼠肠道菌群结构、细菌移位随病程延长发生的改变。方法随机情况下将健康SD大鼠分为对照组(Control组n=10)、SAP组(n=30)。其中SAP组又分为6、12、24 h亚组(每亚组分别为10只大鼠)。按比例配置5%牛磺胆酸钠试剂,采用胰胆管逆行注射制作SAP模型。模型制备成功后分别于6、12、24 h后处死大鼠,检测血清淀粉酶、内毒素水平,观察胰腺及肠黏膜病理改变,用细菌培养法检测腹腔及脏器细菌移位率并用质谱仪鉴定培养出的阳性菌株,16S rDNA、实时荧光定量-聚合酶链式反应(real time-PCR)进行肠腔细菌定量分析。结果 SAP组6、12、24h亚组大鼠血清淀粉酶较对照组升高明显,且>3倍以上(U/L:2086±686 vs. 8707±1672,9012±1505,8797±1298 <0.01),胰腺组织及小肠黏膜出现明显病理损伤;随着病程延长,SAP组大鼠肠腔内大肠埃希菌不断增殖(×10-5:4.53±1.26 vs. 10.07±2.57,16. 18±3.51,19.45±4. 70;P<0. 01),乳酸杆菌不断减少(×10-3:23.12±4.46 vs. 11.43±2. 68,5.20±2.07.2.02±0.94;P <0.01),同样双歧杆菌也不断减少(×10-5:23.30±6.00 vs. 17.61±3.94,13.21±2.84,9.49±3.41;P<0.01);血清内毒素检测阳性率、肠系膜淋巴结及腹腔脏器细菌移位率均不断升高(血清内毒素:0 vs. 30%,50%,60%;肝脏:0 vs. 20%,50%,70%;胰腺:0 vs. 30%,40%,60%;肠系膜淋巴结:0 vs. 40%,70%,80%;P<0.01)。结论 SAP大鼠肠道黏膜屏障受损,肠道菌群紊乱,肠腔内需氧菌与厌氧菌比例倒置,随着病程延长,以大肠埃希菌为主的条件致病菌不断增值,乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧益生菌不断减少,致使肠腔细菌及内毒素移位,其与SAP并发的胰腺及全身感染存在一定关系,且随着病程延长不断加重。
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