【摘 要】
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为了能在体外获得奶牛溶菌酶(LYZ)并研究其抑菌活性,试验采用人工设计并合成LYZ基因CDS序列,将其克隆至表达载体p ET32T并转化大肠杆菌TOP10,筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯
【基金项目】
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徐州市科技计划项目(KC15N0012)
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为了能在体外获得奶牛溶菌酶(LYZ)并研究其抑菌活性,试验采用人工设计并合成LYZ基因CDS序列,将其克隆至表达载体p ET32T并转化大肠杆菌TOP10,筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯化表达产物,并对其进行SDS-PAGE分析和抑菌性检测。重组质粒经PCR、双酶切鉴定结果正确,表达产物经SDS-PAGE检测,分子量约为33 k D,与目标蛋白质一致,且对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑菌作用。本研究成功构建原核表达载体LYZp ET32T并获得了有抑菌活性的奶牛溶菌酶蛋白。
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