人纤维介素蛋白2在昆虫杆状病毒系统中的表达及活性检测

来源 :中西医结合肝病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhufeng19791123
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目的:利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞(Sf9细胞)中表达人纤维介素蛋白2(hfgt2)凝血酶原酶并检测其蛋白活性。方法:首先将PCR扩增的目的基因hfgl2和pENTR/D—TOPO载体连接,再将pENTR/D—TOPO—hfgt2质粒与Baculo Direct^TM线性DNA进行体外基因重组,采用脂质体转染法将重组DNA转染到生长良好的St9细胞中进行病毒包装,经过对重组杆状病毒三轮扩增后,用RT-PCR和Western blotting从基因和蛋白水平检测hfgt2表达情况,一期凝固试验检测其蛋白活
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