观察小干扰RNA(siRNA)特异性沉默人胃癌BGC-823细胞中缺氧诱导因子(HIF-1α、HIF-2α、HIF-1β)后葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达，探讨HIFs对胃癌细胞内GLUT1、PKM2及VEGF的调控差异。
方法用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot法检测转染HIFs及Control小干扰RNA(siRNA)后细胞内GLUT1、PKM2及VEGF的表达。
结果RNA干扰技术沉默HIF-1α后其mRNA、蛋白表达量分别为0.372±0.097、0.351±0.041，均低于空载体组(0.980±0.115、0.520±0.030)及空白对照组(1.000±0.000、0.478±0.062)，差异均有统计学意义(F＝50.358，P＝0.000；F＝10.931，P＝0.010)；RNA干扰技术沉默HIF-2α后其mRNA、蛋白表达量分别为0.391±0.091、0.293±0.031，均低于空载体组(1.037±0.090、0.427±0.026)及空白对照组(1.000±0.000、0.430±0.056)，差异均有统计学意义(F＝72.416，P＝0.000；F＝9.016，P＝0.016)；RNA干扰技术沉默HIF-1β后其mRNA、蛋白表达量分别为0.383±0.091、0.323±0.038，均低于空载体组(0.987±0.100、0.445±0.059)及空白对照组(1.000±0.000、0.457±0.040)，差异均有统计学意义(F＝78.273，P＝0.000；F＝7.636，P＝0.022)。转染HIFs(HIF-1α、HIF-1β、HIF-2α) siRNA后VEGF及GLUT1在mRNA(分别为0.721±0.067、0.833±0.059、0.493±0.067；0.711±0.057、0.826±0.054、0.793±0.068)及蛋白(分别为0.263±0.072、0.303±0.042、0.198±0.057；0.391±0.049、0.451±0.054、0.473±0.086)，表达水平较空载组(mRNA：1.046±0.094、1.039±0.092；蛋白：0.391±0.064、0.690±0.066)及对照组(mRNA：1.000±0.000、1.000±0.000；蛋白：0.438±0.055、0.707±0.040)下降，差异均有统计学意义(VEGF mRNA：F＝35.232，P＝0.000；GLUT1 mRNA：F＝15.364，P＝0.000；VEGF蛋白：F＝8.150，P＝0.003，GLUT1蛋白：F＝17.109，P＝0.000)，其中转染HIF-2α后VEGF表达下调最明显，转染HIF-1α后GLUT1表达下调最明显。转染HIF-1α后PKM2在mRNA(0.611±0.036)及蛋白(0.351±0.047)表达水平较空载体组(1.037±0.197、0.731±0.057)及对照组(1.000±0.000、0.737±0.043)均下降，差异均有统计学意义(F＝12.480，P＝0.007；F＝60.403，P＝0.000)。转染HIF-2α后PKM2 mRNA(0.793±0.067)表达下降，差异均有统计学意义(F＝12.480，P＝0.007)，蛋白无明显变化(0.675±0.030，F＝1.211，P＝0.373)；而转染HIF-1β(mRNA：0.980±0.115，蛋白：0.641±0.076)后PKM2无明显下降(F＝0.144，P＝0.869；F＝2.404，P＝0.171)。
结论研究结果提示HIF-1α、HIF-2α和HIF-1β均参与调控GLUT1、及VEGF的表达，HIF-1α参与调控PKM2，HIF-2α在转录水平可能调控PKM2的表达。