用根癌农杆菌介导法转化大豆萌动子叶节细胞

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利用根癌农杆菌转化萌动大豆成熟子叶节获得了高频率的转基因大豆。从萌发12~16h的大豆种子切取半片种子作为目标组织,对其子叶节组织进行伤处理后,接种于含有pGB载体的LBA4404农杆菌溶液。pGB载体含有除草剂(phosphinothricin,PPT)抗性基因bar和绿色荧光蛋白基因sgfp。将接种的外植体分别在含有3或5mg/L PPT的芽诱导培养基、3mg/L PPT的芽伸长培养基及2~4mg/L PPT的根诱导培养基上进行了筛选。利用萌发5d的外植体进行PPT浓度筛选的结果表明,芽诱导、芽伸长及
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