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目的:构建抗人大肠癌重组双价单链抗体ND-1sc(Fv)2的融合基因,并在大肠杆菌中表达.方法:采用基因重组技术借助GGGGS Linker序列,将2个相同的ND-1scFv基因共价连接,构建pET-28a(+)ND-1sc(Fv)2表达载体,并在大肠杆菌中表达双价单链抗体的融合蛋白.表达产物用Ni-NTA resin亲和层析方法纯化,SDS-PAGE和Western blotting检测表达的目的蛋白.间接免疫荧光和ELISA检测抗体的免疫活性.结果:序列测定表明:ND-1sc(Fv)2基因全长1473