论文部分内容阅读
摘 要：目的：对中药药性实验检测方法的探索。方法：使用优甲乐内热造模小鼠、酵母发热造模大鼠、环磷酰胺虚寒造模小鼠、正常小鼠、大鼠和小鼠的标准化针疗法，还要检测、淫羊藿、黄柏等10味中药，还有着黄连解毒汤等一些中药配方，利用这些中药中的成分对被试的动物的证候影响。结果：要使用不同药性的中药饮片、中药成分和中药复方对被试的动物的寒热证候的现象的影响，同一个药性在不同的模型下，作用是不同的，有些药片的成分与饮片的存在着一样的药性，要探索中药药性实验检测方法。结论：中药复方、中药主要成分和中药的药性需要通过实验进行检测，建立中药药性实验检测方法是可行的。
关键词：中药药性；实验检测；诊断方法
中药药性实验检测方法在实验的过程中是十分关键的，中药药性是十分复杂的，中药药性主要是指四气，这是中医对中药的一种高度性的概括，从本质上来讲，就是指中药的寒热温良的特性，这是中药的一个非常重要的一个标志，在重要的使用中，也要关注中药的特性。现在的中药发展面临着一些难题，那就是没有标准的检测方法，这一问题给中药的使用带来了极大的难题，例如很多的民间草药没有相关的记载记录，有些中药的成分还存在着谜团，这些都是影响着中药发展的制约性因素。从本质上来说，中药药性实验检测方法是十分重要的，这是我国在中药方面面临的一个较大的难题。本文利用大鼠和小鼠的辩证方法进行实验，对中药药性实验檢测方法进行探索。
一、材料和方法
（一）主要材料
1）动物雄性昆明种小鼠、雄性Wistar大鼠。
2）药物
（1）中药饮片：黄柏、栀子、苦参、生晒参、制附子、知母、生大黄、生黄芪、淫羊藿、制吴茱萸；（2）中药复方：黄连解毒汤、疗本滋肾丸、大黄附子汤、左金丸、参附汤、吴茱萸汤；（3）中药有效成分：小檗碱、大黄酚、大黄素、栀子苷、知母皂苷、淫羊藿苷、乌头碱。
（二）方法
1.不同证候造模，分别采用酵母发热大鼠造模、优甲乐内热小鼠造模、环磷酰胺虚寒小鼠造模等。
2.实验要分批进行
在进行中药药性实验检测的过程中，需要按照批次进行：1）如果使用的是不同的中药饮片或还有复方一次性给药，那么就要在连续的给药3h后才可以对正常的小白鼠进行观察，在观测的过程中，主要是对证候影响进行观察。2）如果是优甲乐内热造模小鼠，那么就要在给药后2h后进行观察，用药是中药饮片或者是复方一次性给药，与上一个实验内容在时间上存在着极大的差别。3）如果是酵母发热造模大鼠，那么就要在一次性给药3h后进行观察，主要是对证候影响进行观察。4）如果是环磷酰胺虚寒造模小鼠，也是使用不同的中药饮片或者是复方连续性给药达到了3h才可以进行观察。5）针对优甲乐内热造模小鼠而言，除了以上的观察外，还有着一个需要观察的证候影响，这一证候影响是在中药有效成分，还有就是在相应的中药饮片进行一次性给药2h才可以进行观察。由于实验的组别较多，需要按照相关顺序进行实验，否则会给实验结果造成影响，实验人员也有可能存在着药效错误的情况。
3.大鼠和小鼠标准化诊法和辨证方法
4.统计方法：采用SPSS11.0软件，对用药后/用药前检测值做方差分析。
5.综合以上实验结果，探索和构建中药药性实验检测方法。
二、结果
（一）部分地实验结果
1）在酵母混悬液皮下如果注射了6h，对照组的大鼠在体温上也有着明显的提升。因为这种药物中有着大黄，大黄起到的是纠正的作用，这种药性是寒性的，这一药物中的淫羊藿和知母没有收到任何的影响。2）对照组的小鼠在服用了优甲乐灌胃3h后，在体温上有着过度的回升，因为在这一重要中，知母和大黄属于寒性，会有着不同程度的影响，起到了纠正的作用，但是淫羊藿却没有受到任何的影响。3）灌胃物理刺激对正常小鼠腋温有一定的影响。黄连解毒汤、大黄附子汤给药后，腋温有进一步下降的趋势，提示这2个复方的药性偏寒；而参附汤、吴茱萸汤有微弱的纠正趋势，提示药性偏热。4）对于优甲乐内热小鼠而言，栀子苷与栀子、淫羊藿苷与淫羊藿的药效趋势一致，提示两者确为这些生药的主要成分，且寒温药性一致。（5）一些热性中药如吴茱萸、附子未见促进体温升高的作用，甚至反而下降，提示其热性主要来自于口感和消化道温热感觉，与体温无涉。
（二）中药药性实验检测方法
1.实验动物：采用大鼠、小鼠等多品系动物综合实验，避免仅采用单一品系的实验动物。
2.动物模型的选择：采用多模型实验动物的综合实验，避免仅采用单一模型的实验动物。
3.分组设计
（1）正常对照组、模型组与各实验组；（2）灌胃纯水的正常和模型对照组。灌胃会对大鼠和小鼠证候产生一定的影响，因此应设灌胃纯水对照组，并以该组数据均数作为基数，所有数据与此基数比值并运算；（3）阳性药性药物对照药。作为寒热药性的标准，可选择一些药性覆盖面广、比较稳定的药物，如寒性药栀子、大黄等。
4.动物的标准化诊法与辨证
腋温、眼红外温度、尾红外温度及爪、尾、舌等显微数码拍照，提取反映红色程度的r值及体重、摄食量、饮水量和抓力、跨格数、站立数，；并计算出旷场、红色程度。诊法检测时间点为用药前或用药后。一些长时程实验可以检测至自然恢复后。
5.实验流程
（1）依据文献和预初实验，确定各初诊、造模、用药持续时间和时间点、用药后检测时间等，制定详细的实验方案；（2）购入实验动物常规进行饲养；（3）预检测，令实验动物习惯于诊法工作站及检测，以避免正式实验后可能带来的干扰（体检对于小鼠等实验动物是异常额外刺激，可能会造成恐惧和由此带来的检测数据失真）；（4）造模前全套体检；（5）造模及用药；（6）用药起效后全套体检；（7）必要时增加恢复后全套体检；（8）数据分析。
6.数据分析与统计的一些要求
体温=各动物腋温/对照组均数×0.5（一0.7）+各动物眼红外温/对照组均数×0.4（～0.2）+各动物尾根部红外温/对照组均数×0.1；②红色程度=各动物爪r值/对照组均数×0.7+各动物尾r值/对照组均数×0.3（C57等黑色小鼠尾r权重可降低）。
三、讨论
中药药性实验检测方法的发展趋势：①不断筛选和建立多样化的适宜证候模型，以涉及药性可能体现的大多途径；②不断筛选最为适宜评价药性的小鼠、大鼠等不同品系的实验动物。在中药主要成分、中药和中药复方中，还有一些新的植物或者是动物药，这些药物药性是可以进行检测的，使用药物-生物效应的检测方法进行检测，这种方法需要建立在一定的中药药性上，还要进行实践，这样就可以综合各种症状进行研究和分析，这样就可以保证整个检测的过程不会出现较大的误差，也是生物效应的一种反应。
参考文献：
[1]张永清，王鹏，纪玉佳，王振国.中药药性影响因素研究——炮制的调控作用[J].山东中医药大学学报.2011（01）
[2]肖斌，王耘，乔延江.中药药性与功效的关系研究[J].中国中医药信息杂志.2011（01）
[3]张永清，王振国，滕佳林，纪云，赵传亮.中药药性影响因素研究——药用部位与中药药性[J].山东中医药大学学报.2010（04）
关键词：中药药性；实验检测；诊断方法
中药药性实验检测方法在实验的过程中是十分关键的，中药药性是十分复杂的，中药药性主要是指四气，这是中医对中药的一种高度性的概括，从本质上来讲，就是指中药的寒热温良的特性，这是中药的一个非常重要的一个标志，在重要的使用中，也要关注中药的特性。现在的中药发展面临着一些难题，那就是没有标准的检测方法，这一问题给中药的使用带来了极大的难题，例如很多的民间草药没有相关的记载记录，有些中药的成分还存在着谜团，这些都是影响着中药发展的制约性因素。从本质上来说，中药药性实验检测方法是十分重要的，这是我国在中药方面面临的一个较大的难题。本文利用大鼠和小鼠的辩证方法进行实验，对中药药性实验檢测方法进行探索。
一、材料和方法
（一）主要材料
1）动物雄性昆明种小鼠、雄性Wistar大鼠。
2）药物
（1）中药饮片：黄柏、栀子、苦参、生晒参、制附子、知母、生大黄、生黄芪、淫羊藿、制吴茱萸；（2）中药复方：黄连解毒汤、疗本滋肾丸、大黄附子汤、左金丸、参附汤、吴茱萸汤；（3）中药有效成分：小檗碱、大黄酚、大黄素、栀子苷、知母皂苷、淫羊藿苷、乌头碱。
（二）方法
1.不同证候造模，分别采用酵母发热大鼠造模、优甲乐内热小鼠造模、环磷酰胺虚寒小鼠造模等。
2.实验要分批进行
在进行中药药性实验检测的过程中，需要按照批次进行：1）如果使用的是不同的中药饮片或还有复方一次性给药，那么就要在连续的给药3h后才可以对正常的小白鼠进行观察，在观测的过程中，主要是对证候影响进行观察。2）如果是优甲乐内热造模小鼠，那么就要在给药后2h后进行观察，用药是中药饮片或者是复方一次性给药，与上一个实验内容在时间上存在着极大的差别。3）如果是酵母发热造模大鼠，那么就要在一次性给药3h后进行观察，主要是对证候影响进行观察。4）如果是环磷酰胺虚寒造模小鼠，也是使用不同的中药饮片或者是复方连续性给药达到了3h才可以进行观察。5）针对优甲乐内热造模小鼠而言，除了以上的观察外，还有着一个需要观察的证候影响，这一证候影响是在中药有效成分，还有就是在相应的中药饮片进行一次性给药2h才可以进行观察。由于实验的组别较多，需要按照相关顺序进行实验，否则会给实验结果造成影响，实验人员也有可能存在着药效错误的情况。
3.大鼠和小鼠标准化诊法和辨证方法
4.统计方法：采用SPSS11.0软件，对用药后/用药前检测值做方差分析。
5.综合以上实验结果，探索和构建中药药性实验检测方法。
二、结果
（一）部分地实验结果
1）在酵母混悬液皮下如果注射了6h，对照组的大鼠在体温上也有着明显的提升。因为这种药物中有着大黄，大黄起到的是纠正的作用，这种药性是寒性的，这一药物中的淫羊藿和知母没有收到任何的影响。2）对照组的小鼠在服用了优甲乐灌胃3h后，在体温上有着过度的回升，因为在这一重要中，知母和大黄属于寒性，会有着不同程度的影响，起到了纠正的作用，但是淫羊藿却没有受到任何的影响。3）灌胃物理刺激对正常小鼠腋温有一定的影响。黄连解毒汤、大黄附子汤给药后，腋温有进一步下降的趋势，提示这2个复方的药性偏寒；而参附汤、吴茱萸汤有微弱的纠正趋势，提示药性偏热。4）对于优甲乐内热小鼠而言，栀子苷与栀子、淫羊藿苷与淫羊藿的药效趋势一致，提示两者确为这些生药的主要成分，且寒温药性一致。（5）一些热性中药如吴茱萸、附子未见促进体温升高的作用，甚至反而下降，提示其热性主要来自于口感和消化道温热感觉，与体温无涉。
（二）中药药性实验检测方法
1.实验动物：采用大鼠、小鼠等多品系动物综合实验，避免仅采用单一品系的实验动物。
2.动物模型的选择：采用多模型实验动物的综合实验，避免仅采用单一模型的实验动物。
3.分组设计
（1）正常对照组、模型组与各实验组；（2）灌胃纯水的正常和模型对照组。灌胃会对大鼠和小鼠证候产生一定的影响，因此应设灌胃纯水对照组，并以该组数据均数作为基数，所有数据与此基数比值并运算；（3）阳性药性药物对照药。作为寒热药性的标准，可选择一些药性覆盖面广、比较稳定的药物，如寒性药栀子、大黄等。
4.动物的标准化诊法与辨证
腋温、眼红外温度、尾红外温度及爪、尾、舌等显微数码拍照，提取反映红色程度的r值及体重、摄食量、饮水量和抓力、跨格数、站立数，；并计算出旷场、红色程度。诊法检测时间点为用药前或用药后。一些长时程实验可以检测至自然恢复后。
5.实验流程
（1）依据文献和预初实验，确定各初诊、造模、用药持续时间和时间点、用药后检测时间等，制定详细的实验方案；（2）购入实验动物常规进行饲养；（3）预检测，令实验动物习惯于诊法工作站及检测，以避免正式实验后可能带来的干扰（体检对于小鼠等实验动物是异常额外刺激，可能会造成恐惧和由此带来的检测数据失真）；（4）造模前全套体检；（5）造模及用药；（6）用药起效后全套体检；（7）必要时增加恢复后全套体检；（8）数据分析。
6.数据分析与统计的一些要求
体温=各动物腋温/对照组均数×0.5（一0.7）+各动物眼红外温/对照组均数×0.4（～0.2）+各动物尾根部红外温/对照组均数×0.1；②红色程度=各动物爪r值/对照组均数×0.7+各动物尾r值/对照组均数×0.3（C57等黑色小鼠尾r权重可降低）。
三、讨论
中药药性实验检测方法的发展趋势：①不断筛选和建立多样化的适宜证候模型，以涉及药性可能体现的大多途径；②不断筛选最为适宜评价药性的小鼠、大鼠等不同品系的实验动物。在中药主要成分、中药和中药复方中，还有一些新的植物或者是动物药，这些药物药性是可以进行检测的，使用药物-生物效应的检测方法进行检测，这种方法需要建立在一定的中药药性上，还要进行实践，这样就可以综合各种症状进行研究和分析，这样就可以保证整个检测的过程不会出现较大的误差，也是生物效应的一种反应。
参考文献：
[1]张永清，王鹏，纪玉佳，王振国.中药药性影响因素研究——炮制的调控作用[J].山东中医药大学学报.2011（01）
[2]肖斌，王耘，乔延江.中药药性与功效的关系研究[J].中国中医药信息杂志.2011（01）
[3]张永清，王振国，滕佳林，纪云，赵传亮.中药药性影响因素研究——药用部位与中药药性[J].山东中医药大学学报.2010（04）