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目的
探讨高分辨率熔解曲线分析(HRMA)在成骨不全(OI)相关基因突变筛查中的应用价值。
方法收集2012年3月至12月于天津医院住院的5例OI患儿临床资料。采集患儿、有家族史患儿父母及查体健康者(正常对照)血液标本，PCR- HRMA筛查患儿COL1A1/COL1A2基因所有外显子及其侧翼序列，基因测序确定突变位点。有家族史患儿父母基因测序进行验证。
结果PCR-HRMA显示，5例患儿分别在COL1A1基因11、39、8外显子及COL1A2基因19外显子区域结果异常，患儿熔解曲线与正常对照比较存在差异，提示患儿基因变异，标准熔解曲线显示患儿基因型均为杂合子。5例患儿基因测序结果分别为COL1A1基因c.768dupC、c.2644C>T、c.635G>A以及COL1A2基因c.982G>A、c.948C>T。患儿1、2基因突变导致提前形成终止密码子，临床诊断均为Ⅰ型OI。患儿3、4基因突变均使α螺旋结构域甘氨酸(Gly)被替代，临床诊断为Ⅳ型OI。患儿5基因变异未造成氨基酸的改变，该变异不是导致OI的原因，可能的致病原因有待研究。
结论PCR- HRMA因具有成本低、操作简便快速、高通量、无污染等优势，成为OI基因筛查有效的新方法。COL1A1基因突变c.768dupC为新发现的突变位点。(中华检验医学杂志，2015，38：35-39)