【摘 要】
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目的 探讨RhoA/Rho激酶(ROCK)信号通路对类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLS)迁移、侵袭和增殖的调控作用.方法 RA患者FLS来源于11例活动性RA患者滑膜组织.另设骨关节
【机 构】
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中山大学附属第一医院风湿免疫内科,广州,510080中山大学附属第一医院肾脏病实验室,广州,510080;
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目的 探讨RhoA/Rho激酶(ROCK)信号通路对类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLS)迁移、侵袭和增殖的调控作用.方法 RA患者FLS来源于11例活动性RA患者滑膜组织.另设骨关节炎(OA)组和外伤(正常对照组)为对照.用不同浓度的RhoA抑制剂C3转化酶或ROCK抑制剂Y27632处理RA患者FLS,在迁移和侵袭实验中用10％胎牛血清(FBS)作为诱导物,在增殖实验中以IL-1β为刺激剂.RhoA活性检测采用pull down方法；ROCK活性用磷酸化肌球蛋白结合亚单位1(MYPT1)蛋白表达来表示,磷酸化MYPT1蛋白检测采用免疫印迹法；FLS迁移和侵袭能力采用Transwell小室测定；细胞增殖检测采用MTT法.结果 新鲜分离的RA患者FLS中RhoA和ROCK活性显著高于OA患者和正常对照组,单独FBS诱导组、C3转化酶处理组和Y27632处理组迁移细胞数分别为85±14、51±15、42 ±11,侵袭Matrigel基质细胞数分别为64±13、39±12、26±9,单独FBS诱导组与其他两组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05),C3转化酶和Y27632对RA FLS的细胞骨架的聚合亦有显著的抑制作用.C3转化酶和Y27632呈剂量依赖性地抑制RA FLS增殖.结论 RhoA/ROCK信号通路对RA FLS的迁移、侵袭和增殖具有调控作用,通过抑制过度活化的ROCK可能有利于抑制RA关节破坏.
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