【摘 要】
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采用PCR技术扩增MEV VP2基因,将该基因片段定向克隆原核表达载体PET-30a,构建MEV VP2基因原核表达重组质粒PET-30a-VP2。将该重组质粒转化到宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导后进行SDS
【机 构】
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中国农业科学院特产研究所,山东省文登市畜牧兽医技术服务中心
【基金项目】
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吉林省自然科学基金项目(20140101029JC),吉林省重点科技攻关项目(20150204021NY),吉林省特种经济动物生物制品科技创新中心,中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ASTIP-2014-ISAPS)
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采用PCR技术扩增MEV VP2基因,将该基因片段定向克隆原核表达载体PET-30a,构建MEV VP2基因原核表达重组质粒PET-30a-VP2。将该重组质粒转化到宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导后进行SDSPAGE和Western-blotting分析。结果表明:该基因全长1 755 bp,其目的基因序列完全正确,能编码584个氨基酸。利用载体上的His标签对其进行纯化,经SDS-PAGE鉴定该重组蛋白以包涵体的形式存在,大小约为70 ku;Western-blotting验证该重组蛋白具有被抗
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