体外诱导人牙龈成纤维细胞多向分化潜能的实验研究

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目的探索人牙龈成纤维细胞(h GFs)是否具有多向分化潜能,为组织工程学提供新的细胞来源。方法经志愿者知情同意后收集健康牙龈组织,组织块法培养h GFs。取第3代h GFs进行成骨、成软骨和成脂诱导,未分化诱导的细胞为对照组。分别用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色、阿利新蓝染色、油红O染色检测细胞成骨、成软骨和成脂能力。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中成骨分化标志基因ALP、runt相关转录因子2(Runx2)、成软骨分化标志基因聚集蛋白聚糖(AGR)和成脂分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)的表达。结果成骨诱导组培养至7 d时ALP染色可见大量的蓝紫色沉淀,28 d时细胞周围有大量红染的钙结节沉积,而对照组无钙结节,培养至14 d细胞中ALP和Runx2表达明显高于对照组(P<0.01)。14 d时成软骨诱导组阿利新蓝阳性,成脂诱导组可见红色的脂肪滴,而对照组2种染色为阴性,AGR、PPARγ2表达均明显高于对照组(P<0.01)。结论 h GFs具有成骨、成软骨和成脂分化的多向分化潜能。
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