miR-155在肺腺癌A549细胞侵袭和转移中的作用

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目的

探讨miR-155在肺腺癌侵袭和转移中的作用。

方法

采用实时荧光定量PCR和原位杂交检测miR-155在肺腺癌和癌旁组织以及转移淋巴结中的表达,采用划痕实验和Transwell迁移实验检测miR-155对A549细胞的迁移和侵袭能力的影响;利用生物信息学软件预测miR-155的靶基因,并采用双荧光素酶检测靶基因;采用Western blot和实时荧光定量PCR检测miR-155调控靶基因鼠抗人第10号染色体同源缺失性磷酸酶张力蛋白(PTEN)的表达水平。

结果

实时荧光定量PCR检测显示,肺腺癌组织、癌旁正常组织和转移淋巴结中的miR-155表达水平分别为9.6±3.1、4.1±0.5和7.8±2.2。原位杂交检测显示,肺腺癌组织、癌旁正常组织和转移淋巴结中miR-155阳性表达率分别为(75.4±20.2)%、(23.2±15.3)%和(60.4±25.1)%。划痕实验检测显示,miR-155模拟物组、miR-155模拟物对照组、miR-155抑制剂组和miR-155抑制剂对照组24 h伤口愈合率分别为(43.2±2.2)%、(21.3±4.2)%、(24.3±5.3)%和(35.2±5.1)%,而48 h伤口愈合率分别为(75.2±4.5)%、(52.6±5.2)%、(39.4±4.2)%和(51.5±4.3)%。双荧光素酶报告基因检测显示,miR-155模拟物组与含有PTEN 3'UTR野生型和突变型质粒共转染的荧光素酶值分别为4.7±0.5和7.3±0.7,而miR-155模拟物对照组与含有PTEN 3'UTR野生型和突变型质粒共转染的荧光素酶值分别为7.8±0.9和7.5±0.8。实时荧光定量PCR检测显示,miR-155模拟物组、miR-155模拟物对照组、miR-155抑制剂组和miR-155抑制剂对照组的PTEN mRNA相对表达水平分别为0.5±0.3、1.0±0.1、2.2±0.2和1.2±0.1。Western blot检测显示,miR-155模拟物组、miR-155模拟物对照组、miR-155抑制剂组和miR-155抑制剂对照组的PTEN蛋白相对表达水平分别为0.4±0.1、1.0±0.3、2.8±0.2和1.4±0.1。miR-155模拟物组与miR-155模拟物对照组、miR-155抑制剂组与miR-155抑制剂对照组的PTEN mRNA和蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。

结论

miR-155可能是通过下调靶基因PTEN的表达而促进肺腺癌的侵袭和转移。

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