【摘 要】
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目的 探索在脊髓小脑共济失调7型（SCA7）细胞模型中，1-[1-（4-氟苯基）-2,5-二甲基-1H-吡咯-3-基]-2-（1-吡咯烷基）乙酮（IU-1）激活泛素-蛋白酶体系（UPS）后对多聚谷氨酰胺（PolyQ）共济失调蛋白-7（ATXN7）的作用。方法 在稳定表达ATXN7突变蛋白及非突变蛋白的ATXN7-Q65和ATXN7-Q10神经细胞模型中，利用5×10~4μmol/L IU-1和0.
【基金项目】
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云南省自然科学基金项目（No:82060149）； 大理大学大学生创新团队项目（No:XYPY2020304）； 云南省大学生创新创业项目（No:202010679012,No:202010679018）；
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目的 探索在脊髓小脑共济失调7型（SCA7）细胞模型中，1-[1-（4-氟苯基）-2,5-二甲基-1H-吡咯-3-基]-2-（1-吡咯烷基）乙酮（IU-1）激活泛素-蛋白酶体系（UPS）后对多聚谷氨酰胺（PolyQ）共济失调蛋白-7（ATXN7）的作用。方法 在稳定表达ATXN7突变蛋白及非突变蛋白的ATXN7-Q65和ATXN7-Q10神经细胞模型中，利用5×10~4μmol/L IU-1和0.2μmol/L环氧甲酮四肽分别增强和抑制UPS的降解作用，进而观察ATXN7突变蛋白对细胞的毒性作用。利用蛋白质印迹技术和斑点过滤杂交法检测ATXN7突变蛋白的表达，2-（4-磺苯）-3-（4-硝基苯）-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四氮唑钠盐（WST-1）法分析细胞存活率。结果 在构建的两组神经细胞模型中，ATXN7-Q65细胞表达的ATXN7蛋白及其聚合体随着诱导时间的延长而明显增加，且与ATXN7-Q10细胞相比，在诱导12 d后ATXN7-Q65细胞的存活率明显下降，细胞凋亡率增加（P<0.05）;当加入Dox抑制剂后，与ATXN7-Q10细胞相比，ATXN7-Q65细胞可溶性ATXN7蛋白在24 h内降解缓慢，ATXN7聚合体水平不变。在ATXN7-Q65细胞中，加入IU-1增强UPS活性，12 d后细胞毒性降低，存活率升高；而用环氧甲酮四肽抑制UPS活性，12 d后细胞毒性增高，存活率降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 UPS可有效清除突变蛋白ATXN7,IU-1激活UPS活性能增强突变蛋白ATXN7的清除并降低细胞毒性。
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