类志贺氏菌毒素Ⅱ型变异体基因的克隆与鉴定

来源 :扬州大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:annhongmay
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用聚合酶链式反应(PCR)技术,从大肠杆菌TB1中扩增出类志贺氏菌毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)的A亚单位基因(slt-ⅡeA)的960bp的编码序列和B亚单位基因(slt-ⅡeB)的207bp的编码序列. 将这两个PCR扩增产物在EcoRⅠ和BamHⅠ位点分别克隆进pUC18质粒载体,并转化到大肠杆菌TG1中,再根据限制性内切酶酶切分析筛选到含有slt-ⅡeA的重组质粒p18slt- ⅡeA和含有slt-ⅡeB的重组质粒p18slt-ⅡeB. 将重组质粒p18slt-ⅡeA和p18slt-ⅡeB进行序列分析,结果表明:这两个重组质粒中的插入序列与发表的slt-ⅡeA和slt-ⅡeB是一致的,证明这两个重组质粒就是含有slt-ⅡeA和slt-ⅡeB的重组质粒.
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