【摘 要】
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目的:探讨乳鼠原代心肌细胞的培养方法,简便稳定地获得高存活率和纯度的心肌细胞。方法:无菌条件下取1~3d内新生SD大鼠的心室肌组织,首先用胰蛋白酶消化心肌组织一次,再用I型
【基金项目】
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国家自然科学基金项目,编号:81370342;黑龙江省大学生创新创业训练计划项目,编号:201610222073;佳木斯大学科研项目编号:13Z1201531,13Z1201535;黑龙江省教育厅科研项目,编号:2016-KYYWF-0608;黑龙江省研究生创新项目,编号:YJSCX2012-368HLJ
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目的:探讨乳鼠原代心肌细胞的培养方法,简便稳定地获得高存活率和纯度的心肌细胞。方法:无菌条件下取1~3d内新生SD大鼠的心室肌组织,首先用胰蛋白酶消化心肌组织一次,再用I型胶原酶短时多次消化,然后应用差速贴壁分离法和化学试剂抑制法纯化心肌细胞。对心肌细胞进行形态学观察、存活率检测和免疫荧光鉴定。结果:台盼蓝染色检测心肌细胞存活率在95%以上。培养24h后的心肌细胞已贴壁生长,呈梭形及多边形,有自发性搏动,48h后细胞伪足相互交织成网,进而形成细胞簇,呈现同步性搏动。免疫荧光鉴定心肌细胞纯度达96%。结论:此种方法能够可靠地获得较高存活率和纯度的原代乳鼠心肌细胞。
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