【摘 要】
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利用DNA条形码技术通过ITS2序列分析,建立一种快速鉴定野菊及其易混品的方法。提取22份样品的基因组DNA,对ITS2片段进行PCR扩增、双向测序,获得其ITS2序列信息;并从Gen Bank
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金项目(81503180)
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利用DNA条形码技术通过ITS2序列分析,建立一种快速鉴定野菊及其易混品的方法。提取22份样品的基因组DNA,对ITS2片段进行PCR扩增、双向测序,获得其ITS2序列信息;并从Gen Bank上下载同科或同属序列14条;运用MEGA7. 0对所有36条ITS2序列进行比对、计算种内种间遗传距离,构建Neighbor Joining(NJ)系统进化树,并比较样本ITS2序列间的二级结构差异。结果显示,野菊、条叶旋覆花、蒲儿根、千里光的种内最大遗传距离远小于种间最小遗传距离,具有明显的条形码间距(barcoding gap),而野菊与药用菊的遗传距离重合; NJ树显示野菊、条叶旋覆花、蒲儿根、千里光单独聚为一支,且多数药用菊与部分野菊聚为一亚支;二级结构显示野菊、条叶旋覆花、蒲儿根、千里光之间的二级结构差异显著,且野菊与药用菊共用A和B 2个二级结构;同时也发现野菊是药用菊进化来源之一。因此,ITS2序列作为DNA条形码能准确、快速的鉴别野菊及其易混品,为其种质资源鉴定及临床用药安全提供了重要依据。
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