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目的
探讨睾酮对3T3－L1脂肪细胞－RAW264.7巨噬细胞间接共培养下，分别对脂肪细胞、巨噬细胞炎症因子白细胞介素(IL)－6、巨噬细胞趋化因子(MCP)－1生成的影响、脂肪细胞胰岛素敏感性、巨噬细胞表型的影响及分子机制。
方法3T3－L1前脂肪细胞在双层细胞培养板(Transwell)细胞下室诱导成熟后，与细胞上室的RAW264.7巨噬细胞共培养，用10 μmol/L睾酮处理24 h，酶联免疫吸附测定(Elisa)检测培养液中IL－6、MCP－1的浓度，蛋白质印迹杂交(Western blot)检测核因子κB－p65(NF－κB p65)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)磷酸化的改变、CD16/32、CD206的表达。[3H]－2－脱氧葡萄糖掺入法测脂肪细胞的葡萄糖摄取率。
结果睾酮能促进对3T3－L1－脂肪细胞与RAW264.7巨噬细胞间接共培养体系中炎症因子(IL－6, MCP－1)的生成，促进ERK1/2 、NF－κB p65的活化，抑制脂肪细胞的葡萄糖摄取；睾酮能促进巨噬细胞向促炎性M1型巨噬细胞的分化。睾酮的上述作用可以完全被NF－κB p65的抑制剂吡咯烷二硫基甲酸盐(PDTC)逆转，可部分被ERK1/2的抑制剂PD98059逆转(70%～90%)。
结论NF－κB、ERK1/2可能是睾酮促3T3－L1脂肪细胞－RAW264.7巨噬细胞间接共培养体系炎症因子生成、胰岛素抵抗、巨噬细胞向M1型分化的重要分子蛋白。