【摘 要】
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为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)5’端非病毒核苷酸对感染性克隆拯救的影响,优化PRRSV反向遗传操作平台,本试验构建了含有CMV启动子的PRRSV JXA1-R株全长克隆质粒,在CMV启
【机 构】
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中国动物疫病预防控制中心OIE猪繁殖与呼吸综合征参考实验室
【基金项目】
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现代农业产业技术体系北京市创新团队建设项目(GWZJ-2009-05)
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为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)5’端非病毒核苷酸对感染性克隆拯救的影响,优化PRRSV反向遗传操作平台,本试验构建了含有CMV启动子的PRRSV JXA1-R株全长克隆质粒,在CMV启动子的下游引入锤头核酶序列,并在PRRSV基因组的5 '端上游和锤头核酶下游之间引入非病毒核苷酸,分别构建成5 '端含有非病毒核苷酸GG和GCTAGC的PRRSV全长感染性cDNA克隆Pgg-PRRSV和PNhmPRRSV.新构建的两株克隆质粒直接转染BHK-21细胞拯救,48 h后用间接免疫荧光检测病毒M蛋白,
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