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将携有导肽序列的phbB(编码乙酰乙酰CoA还原酶)和phbC(编码PHB合酶)连入pBIB_HYG得到组成型表达载体pZCB, 用冻融法转入根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens (Smith et Townsend) Conn)并由其介导转化已整合且表达phbA(编码3_酮硫裂解酶)基因并具有卡那霉素抗性的转基因烟草(Nicotiana tabacum L.)。通过二次转化可避开传统杂交育种,在5个月内获得整合PHB合成所需3个基因的转基因烟草。所获转基因植株表型正常, 经PCR、PCR_Southern、RT_PCR_DNA杂交检测确定有50株烟草稳定整合phbB、phbC基因,其中6.67%的植株可在转录水平表达双基因。