DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的实验研究

来源 :中华耳鼻咽喉科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qoqwryi
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拟从细胞凋亡角度出发,探讨能够诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的因素,为有效地防治该恶性肿瘤提供新的思路。方法:光镜下观察细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体比例;DNA凝胶电泳及二苯胺法测定DNA片段化程度。结果:一定浓度的拓朴异构酶Ⅰ(Topoiso-meraseⅠ,TOPOⅠ)抑制剂喜树碱(Camptothecin,CPT)体外作用于人低分化鼻咽癌上皮细胞系CNE-2Z细胞一定时间后,镜下可见细胞体积缩小,染色质凝聚,胞膜突起及凋亡小体形成等形态变化。2~10μmol/L的CPT分别作用12小时后作流式细胞仪检测,亚二倍体比例均为30%左右;各浓度分别作用24小时,亚二倍体比例均为50%左右;同时细胞周期有明显的变化,主要表现为G2/M期细胞减少。DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的梯形带。结论:拓朴异构酶Ⅰ抑制剂CPT对人低分化鼻咽癌上皮细胞具有明显的凋亡诱导作用。 It is intended to explore the factors that can induce the apoptosis of nasopharyngeal epithelial cells from the perspective of apoptosis and provide a new idea for the effective prevention and treatment of this malignant tumor. Methods: Morphological changes of cells were observed under light microscope. Cell cycle and sub-diploid ratio were detected by flow cytometry. DNA fragmentation was detected by DNA gel electrophoresis and diphenylamine method. RESULTS: After a certain concentration of Topoiso-meraseⅠ (CPO) inhibitor camptothecin (CPT) was applied to human poorly differentiated nasopharyngeal epithelial cell line CNE-2Z cells in vitro for a certain period of time, Volume reduction, chromatin condensation, membrane protrusion and apoptotic body formation and other morphological changes. 2 ~ 10μmol / L CPT were detected by flow cytometry 12 hours later, the sub-diploid ratio was about 30%; each concentration for 24 hours, sub-diploid ratio was about 50%; while cells Significant changes in the cycle, mainly as G2 / M phase cells decreased. DNA agarose gel electrophoresis showed a typical trapezoidal band. CONCLUSION: CPT, a topoisomerase I inhibitor, has obvious apoptosis-inducing effect on human poorly differentiated nasopharyngeal epithelial cells.
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