【摘 要】
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牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV)是2011年在我国部分牛场新发现的一种消化道病毒病病原,因此亟需建立针对BEV快速、有效的检测方法。本研究根据BEV 3D基因保守序列,设计
【机 构】
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山东省农业科学院奶牛研究中心; 东北农业大学生命科学学院;
【基金项目】
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现代农业(奶牛)产业技术体系科学家岗位(Cars-37,何洪彬);泰山学者海外特聘专家(tshw20100417);国家自然科学基金(31272586;31302095;31302129);山东省农业重大应用技术创新课题(何洪彬、仲跻峰、王洪梅);兽医生物技术国家重点实验室开放课题基金(SKLVBF201510);山东省自然科学基金培养基金(ZR2014CP029);山东省农业科学院科技创新重
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牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV)是2011年在我国部分牛场新发现的一种消化道病毒病病原,因此亟需建立针对BEV快速、有效的检测方法。本研究根据BEV 3D基因保守序列,设计并合成一对特异性引物,建立了检测BEV的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR方法。该方法与引起牛的病毒性腹泻的其它几种牛的病毒均无交叉反应,检出敏感度达7.13×10~1拷贝/μL,比常规RT-PCR检测方法高10倍。应用该方法检测了3个规模化奶牛场送检的41份奶牛腹泻样本和3份气溶胶样本,腹泻样品阳性检出率为39.02%(16/41);3份气溶胶样本均为阳性,表明该方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可同时检测大量临床样本,本方法为BEV的早期快速诊断和定量分析提供了技术支撑。
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