【摘 要】
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目的 建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定血清中游离胆碱、甜菜碱、三甲胺(TMA)和氧化三甲胺(TMAO)浓度。方法 血清酸化,用乙腈沉淀蛋白和溴乙酸叔丁酯衍生,
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目的 建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定血清中游离胆碱、甜菜碱、三甲胺(TMA)和氧化三甲胺(TMAO)浓度。方法 血清酸化,用乙腈沉淀蛋白和溴乙酸叔丁酯衍生,采用亲水相互作用色谱法(HILIC)分离。以d9-氯化胆碱、d9-TMAO、d9-TMA·HCl为内标,流动相为0.1%甲酸-10 mmol甲酸铵水溶液(A相)和0.1%甲酸乙腈(B相),梯度洗脱,质谱检测。结果 血清中的游离胆碱、甜菜碱、TMA和TMAO得到良好分离,检测浓度线性范围分别为0.391~100μmol/L,0.782~200μmol/L,0.009~2.50μmol/L和0.391~100μmol/L,相关系数R2≥0.998 3,日内精密度在6%以内,日间精密度在10%以内,4种物质的回收率范围均在90%~115%。4℃时各物质的浓度变化范围为1.9%~12.6%;25℃时,胆碱和甜菜碱的浓度变化超过15%。反复冻融后游离胆碱、甜菜碱和TMAO浓度变化均在15%内,TMA浓度变化超出15%。结论 UPLC-MS/MS法可同时检测血清游离胆碱、甜菜碱、TMA和TMAO的浓度,检测结果具有良好的准确度和精密性。
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